《求醫(yī)問(wèn)藥》 2011年11月 第9卷 第11期
鄭俊波1，金祖漢1，張瑞君2，孫瑞祥2，毛培江1，楊毅1，金捷1，黃晶晶1
(1.浙江省中藥研究所，杭州310023；2.杭州抗風(fēng)紅生物技術(shù)有限公司，杭州310011)
摘要：目的 觀察“抗風(fēng)紅”灌胃對(duì)大鼠血尿酸的影響。方法 通過(guò)酵母加腺嘌呤誘導(dǎo)高尿酸血癥大鼠模型，“抗風(fēng)紅”高劑量組、低劑量組每天灌胃給予大鼠，模型組、空白對(duì)照組以等體積生理鹽水同法灌胃，陽(yáng)性藥物別嘌呤醇組在誘導(dǎo)模型四周后給予。給藥4、6周后各組大鼠測(cè)血清尿酸。結(jié)果 “抗風(fēng)紅”高劑量組、低劑量組與模型組比較，血尿酸水平顯著降低。結(jié)論 “抗風(fēng)紅”對(duì)于酵母加腺嘌呤誘導(dǎo)的高血尿酸大鼠模型，其降尿酸效果具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
關(guān)鍵詞：抗風(fēng)紅；高尿酸血癥；痛風(fēng)
Study of reducing the levels of serum uric acid with “Kangfenghong”
ZHENG Junbo1 , JIN Zuhan1, ZHANG Ruijun2, SUN Ruixiong2, MAO Peijiang1,YANG Yi1, JIN Jie1, HUANG Jingjing1(1.Zhejiang Research Institute of Chinese Medicine, Hangzhou310023,China; 2.HangzhouKangfenghong Biotechnology Co.Ltd. Hangzhou310011,China)
ABSTRACT: OBJECTIVE To study the effects of “Kangfenghong” on serum uric acid in hyperuricemic rats induced by adenine combined with yeast extract．METHODS SD rats were divided into 5 groups，control，model，allopurinol group，high dose group，and low dose group．Hyperuricemia in rats were induced by adenine and yeast extract intragastrically，and then serum uric acid were measured at the end of 4、6 weeks． RESULTS high dose group and low dose group could effectively lower the levels of serum uric acid.
CONCLUSION “Kangfenghong” can reduce the levels of serum uric acid effectively.
Key words：Kangfenghong；hyperuricemia；gout
痛風(fēng)(gout)是嘌呤代謝紊亂及/或尿酸排泄減少所引起的一種晶體性關(guān)節(jié)炎,臨床表現(xiàn)為高尿酸血癥(hyperuricemia)和尿酸鹽結(jié)晶沉積所致的特征性急性關(guān)節(jié)炎、痛風(fēng)石形成、痛風(fēng)石性慢性關(guān)節(jié)炎,并可發(fā)生尿酸鹽腎病、尿酸性尿路結(jié)石等,嚴(yán)重者可出現(xiàn)關(guān)節(jié)致殘、腎功能不全。近年來(lái)，隨著人們生活水平的提高，飲食結(jié)構(gòu)發(fā)生變化，糖、脂肪、蛋自質(zhì)的攝入量明顯增加，高尿酸血癥和痛風(fēng)的發(fā)病率日益增高，全球的發(fā)病率呈上升趨勢(shì)，已成為現(xiàn)代社會(huì)的流行病。別嘌呤醇是一種黃嘌呤氧化酶抑制劑，是目前國(guó)內(nèi)外治療高尿酸血癥的主要藥物，然而一些嚴(yán)重的不良反應(yīng)比如腎臟損傷以及過(guò)敏反應(yīng)限制了別嘌呤醇的臨床使用。因此臨床上急需要尋找一種既能降低血尿酸水平又對(duì)腎臟、肝臟沒(méi)有損害作用的飲食治療方法。
“抗風(fēng)紅”是國(guó)家 “七五”、“八五”重點(diǎn)科技攻關(guān)項(xiàng)目培育而成的東北紅蘿卜即“蘿卜核-胞質(zhì)雄性不育系(純雌性系)”新品種，在實(shí)際使用過(guò)程中發(fā)現(xiàn)有抗痛風(fēng)作用，本研究旨在探討“抗風(fēng)紅”對(duì)誘導(dǎo)大鼠高尿酸血癥的血尿酸的影響，為痛風(fēng)人群的膳食指導(dǎo)提供參考，以達(dá)到減少降尿酸藥物帶來(lái)不良反應(yīng)的目的。
1 材料與方法
1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
SD大鼠74只，♀♂各半，體重180±20g，由浙江省實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供，合格證號(hào)：SCXK(浙)2008-0033。本所實(shí)驗(yàn)動(dòng)物設(shè)施條件合格證號(hào)： SYXK（浙）2008-0112、SYXK（浙）2006-0088，大鼠飼養(yǎng)于普通級(jí)大鼠飼養(yǎng)房，普通大鼠顆粒飼料喂養(yǎng)，自由飲食飲水。
1.2 實(shí)驗(yàn)儀器和試藥
723可見(jiàn)光分光光度計(jì)：上海光譜儀器公司產(chǎn)品。
超微粉碎機(jī)：BMF—6型，山東濟(jì)南倍力粉有限公司產(chǎn)品。
腺嘌呤：上海博奧生物科技有限公司，規(guī)格：150g/瓶，批號(hào)：110315
濃縮酵母浸出粉：浙江省富陽(yáng)市杭富生物制品廠，規(guī)格：450g/瓶，批號(hào)：1102120
別嘌呤醇（Allopurinol）：SIGMA公司產(chǎn)品，Lot#070M1560V, Pcode: 1000896098。臨用前用0.5%羧甲基纖維素鈉配成16.7mg/ml。
羧甲基纖維素鈉：用蒸餾水配成0.5%溶液，放置二天后0使用。
“抗風(fēng)紅”：杭州抗風(fēng)紅生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：20110501A。臨用前將鮮品切成粗粒，再用超微粉碎機(jī)粉碎10分鐘后用生理鹽水配成1g/ml和0.5g/ml分別用于高劑量組和低劑量組大鼠給藥。
尿酸測(cè)定試劑盒（酶比色法）：寧波塞克生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：110221
甘油三酯測(cè)定試劑盒（酶比色法）：寧波塞克生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：100608
總膽固醇測(cè)定試劑盒（膽固醇氧化酶法）：寧波塞克生物技術(shù)有限公司，批號(hào)：110104
1.3 動(dòng)物分組和模型誘導(dǎo)
SD大鼠74只，雌雄性各半，隨機(jī)分成5組，分別為”抗風(fēng)紅”高劑量組（16只），”抗風(fēng)紅”低劑量組（16只），陽(yáng)性藥物別嘌呤醇組（16只），模型組（16只）和空白對(duì)照組（10只）。除空白對(duì)照組外，其它各組每天中午灌胃酵母浸膏8g/kg/天，腺嘌呤100mg/kg/天，誘導(dǎo)高尿酸血癥大鼠模型。
1.4 給藥方法
“抗風(fēng)紅”高劑量組以30g/kg每天灌胃給予，低劑量組以15g/kg每天灌胃給予，分上午8∶30、下午4∶30兩次灌胃，給予體積為1.5ml/kg。誘導(dǎo)模型的同時(shí)即給予。陽(yáng)性藥物別嘌呤醇組在誘導(dǎo)模型四周后給予，以50 mg/kg/天灌胃給予，給予方法同”抗風(fēng)紅”組。模型組、空白對(duì)照組以等體積生理鹽水同法灌胃。
1.5 相關(guān)指標(biāo)測(cè)定
（1）血液生化指標(biāo)測(cè)定：分別于給藥4、6周后各組大鼠眼眶采血，分離血清，測(cè)血清尿酸(serum uric acid，SUA)。
1.6 數(shù)據(jù)分析
生化指標(biāo)結(jié)果的統(tǒng)計(jì)用SPSS 16.0軟件進(jìn)行單因素方差分析方法。
2 結(jié)果
2.1給藥四周后對(duì)大鼠血尿酸的影響見(jiàn)表1、2。
表1 給藥四周后各組大鼠血尿酸數(shù)據(jù)描述
Tab 1 Descriptives of serum uric acid in different groups after 4 weeks administration
|
組別 |
N |
均值 |
標(biāo)準(zhǔn)差 |
標(biāo)準(zhǔn)誤 |
均值的 95% 置信區(qū)間 |
極小值 |
極大值 |
|||
|
下限 |
上限 |
|||||||||
|
空白對(duì)照 |
10 |
3.25222 |
.851407 |
.283802 |
2.59777 |
3.90667 |
1.970 |
4.880 |
|
|
|
模型組 |
13 |
4.82462 |
1.418477 |
.393415 |
3.96744 |
5.68179 |
2.790 |
7.900 |
|
|
|
“抗風(fēng)紅”高 |
15 |
3.21333 |
1.082007 |
.279373 |
2.61414 |
3.81253 |
1.050 |
4.760 |
|
|
|
“抗風(fēng)紅”低 |
14 |
3.97357 |
1.391881 |
.371996 |
3.16992 |
4.77722 |
1.970 |
6.500 |
|
|
|
別嘌呤醇 |
10 |
4.50500 |
1.220166 |
.385850 |
3.63215 |
5.37785 |
2.560 |
6.270 |
|
|
|
總數(shù) |
62 |
3.84468 |
1.331121 |
.151695 |
3.54255 |
4.14680 |
.810 |
7.900 |
|
|
注：部分動(dòng)物因模型誘導(dǎo)出現(xiàn)死亡。
Note: Death of part rats because of model induction.
表2 給藥四周后各組大鼠血尿酸數(shù)據(jù)的多重比較
Tab 2 Multiple comparisons of data of serum uric acid in different groups after 4 weeks administration
|
(I)組別 |
(J) 組別 |
均值差 (I-J) |
標(biāo)準(zhǔn)誤 |
顯著性 |
95% 置信區(qū)間 |
|
|
下限 |
上限 |
|||||
|
空白對(duì)照 |
模型 |
-1.5723932) |
.529668 |
.018 |
-2.93585 |
-.20894 |
|
“抗風(fēng)紅”高 |
模型 |
-1.6112822) |
.462858 |
.004 |
-2.80275 |
-.41981 |
|
“抗風(fēng)紅”低 |
模型 |
-.851044 |
.470470 |
.259 |
-2.06211 |
.36002 |
|
別嘌呤醇 |
模型 |
-.319615 |
.513781 |
.958 |
-1.64217 |
1.00294 |
注：與模型組比較，2)p＜0.05
Note:Compared with model group, 2)p＜0.05
別嘌呤醇未給藥，僅與模型組同法處理。表2結(jié)果表明“抗風(fēng)紅”高劑量組與模型組比較，血尿酸水平顯著降低。
2.2給藥六周后對(duì)大鼠血尿酸的影響見(jiàn)表3、4。
表3給藥六周后各組大鼠血尿酸數(shù)據(jù)描述
Tab 3 Descriptives of serum uric acid in different groups after 6 weeks administration
|
組別 |
N |
均值 |
標(biāo)準(zhǔn)差 |
標(biāo)準(zhǔn)誤 |
均值的 95% 置信區(qū)間 |
極小值 |
極大值 |
|
|
下限 |
上限 |
|||||||
|
空白對(duì)照 |
10 |
2.4630 |
1.37187 |
.43382 |
1.4816 |
3.4444 |
.35 |
4.76 |
|
模型組 |
10 |
6.0500 |
2.51108 |
.79407 |
4.2537 |
7.8463 |
2.67 |
11.03 |
|
“抗風(fēng)紅”高 |
15 |
4.2513 |
1.40442 |
.36262 |
3.4736 |
5.0291 |
1.86 |
6.97 |
|
“抗風(fēng)紅”低 |
14 |
4.3643 |
1.33440 |
.35663 |
3.5938 |
5.1347 |
2.44 |
7.20 |
|
別嘌呤醇 |
10 |
2.9160 |
1.32007 |
.41744 |
1.9717 |
3.8603 |
1.05 |
5.34 |
|
總數(shù) |
59 |
4.0536 |
1.94833 |
.25365 |
3.5458 |
4.5613 |
.35 |
11.03 |
表4 給藥六周后各組大鼠血尿酸數(shù)據(jù)的多重比較
Tab 4 Multiple comparisons of data of serum uric acid in different groups after 6 weeks administration
|
(I) 組別 |
(J)組別 |
均值差 (I-J) |
標(biāo)準(zhǔn)誤 |
顯著性 |
95% 置信區(qū)間 |
|
|
下限 |
上限 |
|||||
|
空白對(duì)照 |
模型 |
-3.587002) |
.72042 |
.000 |
-5.3905 |
-1.7835 |
|
“抗風(fēng)紅”高 |
模型 |
-1.798672) |
.65765 |
.028 |
-3.4450 |
-.1523 |
|
“抗風(fēng)紅”低 |
模型 |
-1.685712) |
.66698 |
.047 |
-3.3554 |
-.0160 |
|
別嘌呤醇 |
模型 |
-3.134002) |
.72042 |
.000 |
-4.9375 |
-1.3305 |
注：與模型組比較，2)p＜0.05
Note:Compared with model group, 2)p＜0.05
表4結(jié)果表明東北雌性紅蘿卜高、低劑量組與模型組比較，血尿酸水平均有顯著降低。
2.3各組大鼠死亡情況
表 5 各組大鼠死亡情況
Tab 5 Death of different groups
|
組別 |
動(dòng)物數(shù) |
死亡動(dòng)物數(shù) |
存活動(dòng)物數(shù) |
|
空白對(duì)照 |
10 |
0 |
10 |
|
模型組 |
16 |
6 |
10 |
|
別嘌呤醇 |
16 |
6 |
10 |
|
“抗風(fēng)紅”高 |
16 |
1 |
15 |
|
“抗風(fēng)紅”低 |
16 |
2 |
14 |
3 結(jié)論
血尿酸升高是引發(fā)痛風(fēng)的一個(gè)重要原因。上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，“抗風(fēng)紅”對(duì)于酵母加腺嘌呤誘導(dǎo)的高血尿酸大鼠模型，以30g/kg的劑量給予四周后，其降尿酸效果具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。給予六周后15g/kg的劑量其降尿酸效果也具有高度統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。說(shuō)明“抗風(fēng)紅”對(duì)于尿酸升高引起的痛風(fēng)有顯著的治療作用。
酵母加腺嘌呤誘導(dǎo)高尿酸大鼠模型時(shí)肝腎功能的損害常會(huì)引起大鼠死亡。實(shí)驗(yàn)過(guò)程中發(fā)現(xiàn)“抗風(fēng)紅”能減少這種死亡，其具體機(jī)理需要進(jìn)行進(jìn)一步研究。
REFERENCES
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[4] ZUANG L P,LIU Z G, et al. Pathogenesis and treatment progress of hyperuricemia[J] Herald of Medicine (醫(yī)藥導(dǎo)報(bào)),2011,30(1):69-73.
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[6] LU X L, et al.Effects of Allopurinol on Cardiac Function and Serum Uric Acid Level in Hyperuricemic Patients with Chronic Heart Failure[J] Clinical Medicine and Engineering (臨床醫(yī)學(xué)工程),2010,17(6)52-53.
